▎ 用途
该试剂盒采用竞争法检测血清、血浆、细胞培养上清液中环磷酸鸟苷(cGMP)的浓度。
▎ 检测原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗环磷酸鸟苷(cGMP)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入环磷酸鸟苷(cGMP)校准品和待测样本,再加入HRP标记的环磷酸鸟苷(cGMP)抗原(酶标抗原),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-酶标抗原的免疫复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪450nm波长上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中环磷酸鸟苷(cGMP)的浓度负相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中环磷酸鸟苷(cGMP)的浓度。
反应类型 | 竞争法 |
规格 | 96T/48T |
中文名称 | 环磷酸鸟苷(cGMP)定量检测试剂盒(ELISA) |
反应时间 | 1.5 h |
检测方法 | 酶联免疫吸附测定 |
检测范围 | 0.375 nmol/L – 12 nmol/L |
灵敏度 | 0.1 nmol/L |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
▎ 特异性
可检测样本中的cGMP , 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎ 重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎ 标曲图
▎ 批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎ 批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎ 精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎ 稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎ 试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
英文名称 | 中文名称 | 规格 | 规格 |
Microe isa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T |
Standard | 标准品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 |
HRP-Corjugate | HRP标记抗体 | 10mL | 5mL |
Sample Diluent | 样本稀释液 | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL |
Stop Solution | 终止液 | 6mL | 3mL |
20× Wash Solution | 20×浓缩洗涤液 | 25mL | 15mL |
Product Description | 说明书 | 1份 | 1份 |
Sealing film | 封板膜 | 2张 | 2张 |
▎ 实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸馏水或去离子水.
5、脱脂棉吸水纸.
6、37℃恒温箱.
7、100ml和1000ml量筒.