▎ IgM 概述
免疫球蛋白M(IgM),具有多种功能,包括抗原结合活性;相同的蛋白质结合活性;以及免疫球蛋白受体结合活性。作用于多个过程的上游或内部,包括早期内体到晚期内体的转运;免疫球蛋白介导的免疫反应;以及B细胞增殖的正调控。位于细胞质膜的外侧;细胞外空间;以及细胞质的核周区域。是循环中B细胞受体复合物和免疫球蛋白复合物的一部分。在多种结构中表达,包括大脑;血淋巴系统;和肝脏。用于研究非霍奇金淋巴瘤和1型糖尿病。该基因的人类同源基因与无丙种球蛋白血症有关。与人类IGHM(免疫球蛋白重恒定μ)同源。
▎ 别名
Igm; muH; Igh6; Igh-6; Igh-M
▎ 用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 IgM 浓度。
▎ 检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
反应类型 | 双抗夹心法 |
规格 | 96T/48T |
中文名称 | 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 |
反应时间 | 1.5 h |
检测方法 | 酶联免疫吸附测定 |
检测范围 | 50 μg/mL – 1600 μg/mL |
灵敏度
| 10 μg/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型
| 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
▎ 特异性
可检测样本中的IgM , 且与其它类似物无明显交叉反应。
▎ 重复性
板内,板间变异系数均<10%。
▎ 标曲图
▎ 批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
▎ 批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
▎ 精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批间差: CV<13%
▎ 稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
▎ 试剂盒的组成
▲未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存。
英文名称 | 中文名称 | 规格 | 规格 |
Microe isa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T |
Standard | 标准品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 |
HRP-Corjugate | HRP标记抗体 | 10mL | 5mL |
Sample Diluent | 样本稀释液 | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL |
Stop Solution | 终止液 | 6mL | 3mL |
20× Wash Solution | 20×浓缩洗涤液 | 25mL | 15mL |
Product Description | 说明书 | 1份 | 1份 |
Sealing film | 封板膜 | 2张 | 2张 |
▎ 实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸馏水或去离子水.
5、脱脂棉吸水纸.
6、37℃恒温箱.
7、100ml和1000ml量筒.
▎ ELISA操作视频