碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

▎ 产品简介

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称 ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。

▎  测定原理

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在pH9.2～9.8的碱性条件下细胞内碱性磷酸酶可使 AS-BI磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中，该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色, 碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于胞桨，结果较金属盐沉淀法可靠。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

▎ 检测方法

偶氮偶联法

▎ 需自备的仪器和用品 

1、载玻片、湿盒

2、显微镜

3、4%多聚甲醛固定液(备选) 

▎ 注意事项

1 、AS-BI 染色液易失效，应避免反复冻融，临用前低温缓慢溶解，不可用 温水或热水助溶。

2 、ALP 孵育液易失效或降低阳性强度，即配即用，不宜久置。

3 、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。

4 、培养细胞染色操作过程中，清洗、染色等步骤都应轻微，以免损伤或丢失细胞。

5 、培养细胞或细胞爬片染色建议采用4%多聚甲醛固定液，ALP固定液更适用于血液或骨髓细胞图片的固定，染色时间应根据具体细胞特性而异。

有效期：12 个月有效。