T2毒素（T2）ELISA检测试剂盒

▎ 检测原理

T2毒素（T2）是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品，对人类健康及畜牧业构成了较大危害。T2毒素主要影响血液，肝脏，肾脏，胰腺肌肉及淋巴细胞的功能，T2毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经机能障碍等。使用T2毒素试剂盒则能够快速而准确的分析样品中T2毒素残留。

本试剂盒采用一步竞争ELISA方法检测玉米、饲料等样本中的T2毒素，试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原与样本中T2毒素竞争抗T2毒素抗体(抗体工作液)，同时抗T2毒素抗体与酶标二抗（酶标记物）相结合，经TMB底物显色，样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中T2毒素的含量。

▎ 检测范围

本试剂盒应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,可定性、定量检测玉米、饲料、样本中T2毒素的含量。

▎  试剂盒组成

▎  使用单位需自备的设备及试剂

（1）仪器    

微孔板酶标仪(450 nm)；

振荡器；

离心机；

涡旋仪；

电子天平（感量0.01 g）

（2）器材    

容量瓶：100 mL，500 mL，1000 mL

单道微量移液器：20 μL～200 μL，100 μL~1000 μL

多道微量移液器：30 μL～300 μL

（3）试剂    

甲醇、    

▎  酶联免疫检测步骤

测定前须知：    

1、 使用之前将所有试剂和需用微孔板回升至室温。    

2、 使用之后立即将所有试剂放回2~8 ℃。    

3、 在使用中不要让微孔干燥。    

4、 在ELISA分析中的重复性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。    

5、 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜盖住微孔板。    

测定步骤：    

1、 将所需试剂和微孔板从冷藏环境中取出，在室温下平衡30 min，每种液体使用前均须摇匀。注意标准液均需做2个平行试验。

2、 加标准品/样品：加入标准品/样品50 μL/孔，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖好，室温25 ℃避光反应30 min。

3、 洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加洗涤液 300 μL/孔，每次浸泡15~30 s，充分洗涤5次，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

4、 显色：加入底物液A 50 μL/孔，底物液B 50 μL/孔，用盖板膜盖好，室温25 ℃避光反应15 min（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

5、 测定：每孔加入50 μL终止液，设定酶标仪在450 nm处（建议用双波长450/630nm），测定OD值（建议在10 min内读完数据）。

▎  试剂盒灵敏度、准确度、精密度

试剂盒灵敏度：0.1ppb

样本最低检测限：玉米、饲料………………21ppb    

回收率：   玉米、饲料……………85±15%    

精密度：试剂盒的变异系数均小于10%    

▎  贮藏条件及保存期

贮藏条件：在2~8 ℃保存试剂盒。    

保存期：本试剂盒有效期为12个月。