Zerba FISH T ELISA Kit（斑马鱼睾酮定量ELISA试剂盒）

▎  用途

该试剂盒采用竞争法检测血清、血浆、细胞培养上清液中斑马鱼睾酮（T）的浓度。

▎  检测原理

试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记T，纯化的抗MT抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记T及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的T结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的T结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化T，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化T -酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着T浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中T的减少或升高有可靠的检出性能。

▎  特异性

可检测样本中的 T , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.