Click-iT EdU-647细胞增殖检测试剂盒

▎ 产品原理

通过分析细胞增殖能力来判断某些基因、药物等对体外培养的细胞影响，或者分析不同状态或刺激干预下生物个体组织细胞的生长和更新能力，是生命学科中一种常见且重要的评估手段。目前检测细胞增殖的方法有很多，大部分是利用细胞产生的一些代谢酶类，来间接评定细胞的增殖活性（如CCK-8法、MTT法等），但是一些药物或细胞本身状态等因素都会对评定的结果造成一定影响。直接检测细胞中DNA合成，来判断细胞的增殖是公认的最精确且有效的检测方法。但是不论是最初使用的放射性标记核苷掺入法，还是后续改进的基于抗体检测的BrdU法，都有着一定的自身局限性。

EdU（5-Ethynyl-2'- deoxyuridine，5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷）是一种含有一个乙炔基团的胸腺嘧啶脱氧核苷类似物，当将其注射到动物体内或者对体外培养的细胞进行孵育，这些小分子能够迅速扩散到各个器官组织，并渗入到细胞中，可以在细胞增殖时期代替胸苷（T）掺入到新合成的DNA中。EdU分子中的乙炔基团能与荧光标记的叠氮化合物探针在铜离子催化下发生“点击”反应形成稳定的三唑环，因此可以使新合成的DNA被相应的荧光探针所标记。EdU检测法同放射性标记核苷掺入法相比，没有放射性污染等限制因素；同BrdU检测法相比，EdU检测法不需要DNA的变性处理，也不用抗原抗体反应，这大大减少了实验的复杂性和时间，也使其变得更省时、更灵敏、更稳定和更准确。本试剂盒可用于检测体外培养的细胞或动物组织中细胞增殖情况。本试剂盒中荧光探针为粉色（远红外）荧光，最大激发波长为656 nm，最大发射波长为670 nm，处于增殖的细胞被标记后，细胞核会显示出明亮的粉色荧光，通过配套常规细胞核染料共同标记细胞核（本试剂盒提供Hoechst 33342细胞核染料），可用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等仪器直接观察细胞增殖情况；也可以使用流式细胞仪检测体外培养细胞群荧光强度，根据荧光强度，来判断细胞周期中S期的DNA复制活性。