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免疫组化试剂盒(抗兔二抗)

ZC-G2129 货号
规格
200次
价格(RMB)
680.00

 产品简介


该试剂盒是一个特别敏感的两步法免疫组化试剂盒,适用于一抗来源为兔的抗体。其中二抗为辣根过氧化物酶与山羊抗兔IgG结合而成的分子,该分子与兔来源一抗(先与抗原反应)结合,结合后的大分子即标记有辣根过氧化物酶,再与DAB反应,得到棕黄色沉淀。由于该系统不含生物素和链霉亲和素,所以不受内源性生物素干扰,染色背景非常清晰。


 保存条件


整套试剂盒-20℃保存。二抗-20℃保存;DAB稀释液和50×DAB原液4℃保存;有效期12个月


 建议稀释比


DAB稀释液               12.5 mL
50×DAB原液              250 μL
HRP标记山羊抗小鼠二抗        100 μL


 注意事项


1.如果为冰冻切片或细胞爬片,请将标本固定后自第3步开始。
2.以上步骤仅供参考,请根据实际情况调整。


 使用方法


1.常规切片脱蜡至水。
2.于修复液中修复。一般为Tris-EDTA或柠檬酸修复液。
3.加过氧化物酶阻断剂(常用3%过氧化氢)于组织上避光孵育15分钟。蒸馏水冲洗。
4.PBS冲洗三次,每次5分钟。
5.浓度为3%的BSA(pH7.2-7.4的PBS缓冲液配制)或正常山羊血清工作液于组织上孵育30分钟,封闭非特异性结合位点。
6.甩净封闭液,每张切片加入50-100 μL一抗工作液,4℃过夜。
7.PBS冲洗三次,每次5分钟。
8.每张切片加入50-100 uL二抗工作液(二抗原液G1216-3用pH7.2-7.4的PBST以1:200的比例稀释),室温下孵育30-60分钟。
9.PBS冲洗三次,每次5分钟。
10.DAB工作液配制:每1 mLDAB稀释液(G1216-1)中加入20μL 50×DAB原液(G1216-2),混匀备用。也可根据试验结果再适当稀释后使用。
11.每张切片加50-100 μL新鲜配制的DAB工作液,室温下孵育。显微镜控制具体显色时间。
12.显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗。苏木素复染,0.1%盐酸分化,自来水冲洗返蓝。
13.切片经过梯度酒精(70-100%)脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。



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