▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
白细胞介素 9 (IL-9)是一个分子量为 14 kDa 的糖基化蛋白, 包含 10 个参与二硫键连接的半胱氨酸残基。它是由 T 细胞特别是 CD4+辅助性细胞产生的细胞因子, 可调节多种造血细胞。 该细胞因子刺激细胞增殖、 阻止细胞凋亡。 它是通过与 IL-9 受体结合起作用的,可激活不同的信号转导及激活(STAT)蛋白,从而参与多种生物过程。编码该细胞因子的基因已被确定为哮喘的候选基因。小鼠模型的哮喘遗传研究表明, 这种细胞因子是支气管高反应发病机制的一个决定性因素。 IL-9介导的自分泌环的存在暗示着一些恶性肿瘤如霍奇金病的存在。 IL-9 由李-斯二氏细胞、霍奇金淋巴瘤细胞和一些大型再生障碍性淋巴瘤细胞表达,而非霍奇金淋巴瘤和外周 T 细胞淋巴瘤不表达。
▎ 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-9 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 IL-9与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中IL-9 浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 双抗夹心ELISA(定量)
|
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 人
|
检测范围 | 7.81-500pg/ml |
灵敏度
| 0.1pg/mL
|
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。