▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
干扰素(IFNs)是宿主细胞在响应病原体(如病毒、细菌、寄生虫或者肿瘤细胞)时合成和释放的一组信号蛋白。在通常情况下, 病毒感染的细胞会释放干扰素, 使周围的细胞提高其抗病毒防御能力。 基于受体类型,人类干扰素可分为 3 大类型: I 型干扰素, 包括 IFN-α、 IFN-β、 IFN-ε、 IFN-κ和 IFN-ω, II 型干扰素(在人类中称为 IFN-γ)和 III 型干扰素。IFN-α 蛋白由白细胞产生, 主要参与响应病毒感染的先天性免疫。 研究显示加强肿瘤浸润巨噬细胞中 IFN-α 的表达可引起更有效的树突状细胞活化和免疫效应细胞毒作用。IFN-α 作为致热因子,可通过改变下丘脑中热敏神经元的活性来导致发热。 运用类似机理, IFN-α 可用来减轻疼痛, 与 μ-阿片受体相互作用来作为止痛剂。
▎ 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 IFN-α单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 IFN-α与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中 IFN-α浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 双抗夹心ELISA(定量)
|
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 人
|
检测范围 | 15.63-1000pg/ml |
灵敏度
| 1.0pg/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。