▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
肿瘤坏死因子 α (TNF-α) 也称为恶病质素和 TNFSF1A, 是一种脂肪因子,参与全身的炎症,同时也是刺激急性期反应的细胞因子之一。 它主要由活化的巨噬细胞产生, 也可由其它类型的细胞分泌,如 CD4+ 淋巴细胞、 NK 细胞、 中性粒细胞、 肥大细胞、嗜酸性粒细胞和神经元等。 它在免疫应答中具有多种调节功能, 还可作为潜在的热原。 TNF-α 对刺激物 (感染因子或组织受损) 产生应答后,在全身循环,激活中性粒细胞,改变血管内皮细胞的特性, 调控其它组织的代谢活性,以及通过诱导局部凝血作用展现肿瘤杀伤活性。 TNF-α 在关节组织和其它组织发生炎症的发病机制具有重要作用。 最近,越来越多的信息表明 TNF-α 也参与了 AIDS 的发病机制。 TNF-α 的测定对于移植研究也非常有用。
▎ 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人TNF-α单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的TNF-α与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中TNF-α的浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 双抗夹心ELISA(定量)
|
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 人
|
检测范围 | 15.63-1000pg/ml |
灵敏度
| 1.0pg/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。