▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
Interleukin-8 ,IL-8,白介素 8。属于一组小的分泌型炎症性细胞因子,对特定的白细胞具有趋化作用,这些细胞因子被命名为 chemokine。根据其 4 个半胱氨酸在序列中的位置可分四组:α组为 C-X-C;β组为 C-C;γ组缺乏第一和第三个半胱氨酸;此三组分子量在 7-15KD 之间。第四组为 C-X3-C,序列长度达到 373 个氨基酸。IL8 实际上是一种 CXC 类细胞趋化因子,可以受到白介素、TNFα、IFNγ、细菌病毒产物、脂多糖等的刺激而产生。很多免疫类细胞和非免疫系统的细胞都能合成 IL8,如内皮细胞、间皮细胞和纤维细胞等。人的 IL-8 的前体有 99 个氨基酸。成熟形态为 79 个氨基酸。
▎ 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-8 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 IL-8与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。(streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中IL-8的浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 双抗夹心ELISA(定量)
|
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 人
|
检测范围 | 15.63-1000pg/ml |
灵敏度
| 0.8pg/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。