Mouse GSH-Px ELISA Kit（小鼠谷胱甘肽过氧化酶ELISA试剂盒）

▎  GSH-Px概述

谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)，该基因编码的蛋白质属于谷胱甘肽过氧化物酶家族，其成员催化谷胱甘肽还原有机氢过氧化物和过氧化氢（H2O2），从而保护细胞免受氧化损伤。其他研究表明，H2O2对生长因子介导的信号转导、线粒体功能和巯基氧化还原平衡的维持也至关重要；因此，通过限制H2O2的积累，谷胱甘肽过氧化物酶也参与调节这些过程。脊椎动物中存在该基因家族的几种同工酶，其细胞位置和底物特异性各不相同。这种同工酶是最丰富的，在细胞质中普遍表达和定位，其首选底物是过氧化氢。它也是一种硒蛋白，在其活性位点含有罕见的氨基酸硒半胱氨酸（Sec）。Sec由UGA密码子编码，通常表示翻译终止。硒蛋白mRNAs的3'UTR包含一个保守的茎环结构，称为Sec插入序列（SECIS）元件，这是将UGA识别为Sec密码子而不是停止信号所必需的。该基因在编码区包含一个框内GCG三核苷酸重复，在人群中发现了三个具有4、5或6个重复的等位基因。具有4个GCG重复序列的等位基因与绝经前妇女乳腺癌症风险显著相关。或者，已经发现了该基因的剪接转录变体。该基因座的假基因已在X和21号染色体上被鉴定。

▎  别名

GPXD; GSHPX1

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中GSH-Px 浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的GSH-Px , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.

▎ELISA操作视频